FDNB是2，4二硝基氟苯。FDNB法是反应中氨基酸的氨基发生烃基化反应，应用于蛋白质一级结构的测定。FDNB与蛋白质在室温，酸碱度在8至9，在适当条件下反应，生成DNP蛋白。随之，在105摄氏度，6摩尔每升的盐酸条件下水解，生成DNP氨基酸及其它游离氨基酸。由于DNP氨基酸溶于乙醚，而其余氨基酸不溶，故用乙醚抽提出DNP氨基酸，再将未知样的DNP氨基酸与已知标准DNP氨基酸在相同条件下进行纸层析，根据比移值即可推断未知样N末端为何种氨基酸。